提到PCR,必然會想到PCR封板膜。別看只是一張小小的PCR封板膜,但對于PCR實驗結果卻非常重要。小編今天就帶大家看看如何選擇合適的封板膜。
PCR(聚合酶鏈式反應)作為生物分子實驗常規實驗技術之一,已經廣泛普及。提到PCR,必然會想到PCR封板膜。別看只是一張小小的PCR封板膜,但對于PCR實驗結果卻非常重要。小編今天就帶大家看看如何選擇合適的封板膜。
PCR/qPCR封板膜背景
根據PCR檢測信號的原理,可將其分為普通PCR和熒光定量PCR(qPCR)。根據其通量大小,則會用到不同通量的管子/板子(如:單檢測管、八聯檢測管、高通量的96/384孔PCR板等)。
就單管和八聯管而言,不論是終點檢測的PCR還是實時檢測的qPCR,我們均需選擇管子導熱好且均一、管蓋和管體密封性好的產品。對于需要使用高通量的96/384孔板,一般只需要滿足導熱均勻且傳熱性好,高溫加熱不變形等要求;而封板膜則需要根據是普通PCR還是qPCR來選擇。
PCR/qPCR封板膜選擇指南
有時候很容易將PCR和qPCR的封板膜弄混,進而使得qPCR的結果不好,浪費樣品、時間及費用等。
就普通封板膜而言,材質大多是是聚丙烯,無RNase/DNase及核酸,封板容易,不易卷曲,耐受適合的溫度即可。
相對普通PCR封板膜而言,由于很多qPCR儀的光路檢測通道都位于上方,這就使得其對于封板膜的透光度要求更高;其次要求自身熒光背景;此外,蒸發率低、密閉性好等因素也是很重要的。任何因素的變化,都有可能影實驗結果,使得結果不理想。
因此,在尋找PCR或者qPCR封板膜時,需要基于以上因素選擇。