PCR實驗時該如何選擇合適的耗材呢？本篇教你

　　關于PCR實驗有哪些影響因素呢?我們一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質量、反轉錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴增長度等問題，但很少有人會想到耗材的選擇，可能也會影響您的實驗結果。
 

　　銀杏(學名：Ginkgo biloba L.)為銀杏科、銀杏屬落葉喬木。因其已存在數萬年之久，也被稱為生物界的“活化石”。
 

　　關于其基因組的測序和信息分析，早在兩年前就由華大基因、浙江大學和中國科學院的科學家團隊共同合作完成。后續功能的驗證主要包括PCR檢測、ChIP、IP、IHC、IF、FISH等手段。而其中就簡單的方式就是PCR驗證，那關于PCR實驗有哪些影響因素呢?
 

　　我們一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質量、反轉錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴增長度等問題，但很少有人會想到耗材的選擇，可能也會影響您的實驗結果。那么關于PCR實驗耗材我們改如何選擇呢?
 

　　首先需要明確的是我們做的是哪種PCR實驗。根據檢測方法的不同，PCR實驗分為普通PCR法和熒光定量PCR法，前者一般是終點PCR跑膠法測定，所以在選擇耗材時需要關注的主要是耗材本身的導熱性和密封性;而后者是實時檢測熒光信號，除了導熱性和密封性外，對透光性和避光性也有所要求。換句話而言，可以做熒光定量PCR的耗材一定可以來做普通PCR，反之，效果卻會差很多!
 

　　確定好了實驗類型，我們就可以選擇耗材了，如前面所述，我們知道了密封性、導熱性、透光性、避光性等因素是我們需要關注的，那為什么要關注這些呢?
 

　　一、密封性
 

　　密封性越好，產物的揮發越少，得到的產物就越多同時氣溶膠的產生也越少，對于下一輪實驗的污染也就越少，也就意味著假陽性的產生率越低。
 

　　二、導熱性
 

　　導熱性越好越均一，PCR的速度就越快，準確度也越高。
 

　　三、透光性
 

　　這主要是對于熒光定量而言，我們知道它是一種實時定量的方式，那么耗材本身的透光性就直接關系到我們檢測到的熒光信號多少，如果選擇耗材透光性不足，本該檢測到的信號檢測不到，那就會造成我們對結果的誤判。
 

　　四、避光性
 

　　這也是針對熒光定量而言的，同上面的因素，如果我們在整個實驗過程中沒注意避光，帶有熒光的試劑過度被消耗，那最直接就會影響我們實驗的擴增效率，導致不準確的結果產生。
 

　　基因有限公司提供的GENEPLASTIX系列實驗室耗材全線產品均是在十萬級凈化車間注射成型及裝配，除了確保無DNase、無RNase、無熱源外，在密封性、導熱性、透光性、避光性等方面都在市面上表現比較優異。